Affinity的Plastic gel预制胶Tris-Gly是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶，常用于PAGE和Western blot检测。

产品特点：

◆采用镀膜塑料胶板，有效减少蛋白非特异性吸附。蛋白条带更为敏锐，清晰

◆胶夹易开，塑料板可用螺丝刀轻松撬开

◆预制胶中不含SDS，可用于变性和非变性电泳

◆采用自动化的灌胶生产技术，确保产品质量的高稳定性和重复性

基本信息：

使用说明：

预制胶本身都不含SDS，可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳

非变性电泳（Native-PAGE）

1. 将Plastic gel预制胶Tris-Gly 从包装袋中取出，撕掉底部密封胶带；

2. 将预制胶固定在电泳槽中；

3. 向电泳槽中加入1 × Tris-Glycine非变性电泳缓冲液。内槽加满电泳缓冲液，外槽电泳缓冲液需至少加至1/3液面，最高不可漫过胶板，然后缓慢拔出梳子；

4. 用移液器轻轻吹打加样孔，清除残余胶液；

5. 上样：将非变性蛋白样品与5 × 非变性Loading buffer进行4：1混合均匀。上样时注意枪头勿刺破凝胶或插入过深使胶板变形造成后续电泳时漏液；

6. （酸性蛋白（等电点pI<7）正常上样电泳即可。反之，碱性蛋白（等电点pI>7）带正电荷，需将电极插反（红插黑，黑插红），这时上样孔成为正极，样品向下电泳）

7. 接通电源，恒压条件下（180 V）跑胶。当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

8. 电泳结束，取出凝胶。用螺丝刀在板子侧边缘慢慢撬开板子，打开胶盒，轻轻取出凝胶。（具体操作见“拆胶”部分）。

注：非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

变性电泳（SDS-PAGE）

1. 将Plastic gel预制胶Tris-Gly 从包装袋中取出，撕掉底部密封胶带。固定在电泳槽中，安装好电泳装置；

2. 向电泳槽中加入1 × Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。内槽加满电泳缓冲液，外槽电泳缓冲液需至少加至1/3液面，最高不可漫过胶板，然后缓慢拔出梳子；

3. 用移液器轻轻吹打加样孔，清除残余胶液；

4. 上样：将蛋白样品与5 × 变性Loading buffer进行4：1混合均匀，加热处理。上样时注意枪头勿刺破凝胶或插入过深使胶板变形造成后续电泳时漏液；

5. 接通电源，恒压条件下跑胶（180 V），当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳；

6. 电泳结束，取出凝胶。用螺丝刀在板子侧边缘慢慢撬开板子，打开胶盒，轻轻取出凝胶。（具体操作见“拆胶”部分）。

注：请参考下面的分离图谱选择合适浓度的预制胶，以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

注意事项：

1. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直，可降低电压至150 V，并适当延长电泳时间；

2. 电压为180 V电泳时，1块胶的初始电流在75 mA左右，2块胶的初始电流在150 mA左右，且随时间增加电流逐步降低；

3. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后，缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化，不能确保电泳效果；

4. 湿转时120 V恒压转膜60 - 90 min。为达到更好的转膜效果，可以根据预制胶上残留的预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率，并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量，凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。

5. 仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床医学诊断及其他非合理用途。不得存放于普通住宅内；

6. 为了您的安全和健康，请穿戴好个人防护装备和实验服装进行操作。